Що представляє собою контроль якості тест-системи за специфічністю скріплення міченого ліганда
Специфічність (або вибірковість) тесту означає можливість відділення речовини, що визначається, від домішок, що дають пе- рехресні реакції. Вона насамперед визначається специфічністю первинної антисироватки. Специфічне антитіло здатне відрізни- ти речовину, що вимірюється від інших, дуже близьких за будо- вою субстанцій. Специфічність, або, вірніше, перехресну реактивність, визна- чають таким чином:1. Різні концентрації стандартної речовини (С) відкладають на осі абсцис; на осі ординат – відповідні значення
В 0 —— 100% T , де В=С 0 , С 1 ..., С n , С 0 =0, С 1 =1, ..., С n =1×10 n . Будують калібрувальну криву. На осі ординат знаходять точ- ку 1 С 0 — . —— 100% 2 T , тобто С 0 —— T =50%. З цієї точки проводять пряму, пара- лельну осі абсцис. Припустимо, що для кортизолу С 0 —— T =50% від- повідає концентрації, рівній 2,5 нг на пробу. Необхідно визначити відсоток перехресної реактивності для інших стероїдів, напри- клад, альдостерону, тестостерону тощо. Для цього роблять таке ж розведення концентрацій названих речовин і будують для них криві на тому ж графіку, на якому вже є крива для кортизолу. Як- що крива для альдостерону перетинає перпендикуляр, відновле- ний з точки С 0 —— T =50% для кортизолу, є перехресна реактивність. Її відсоток обчислюють таким чином. Нехай для альдостерону С 0 —— T =50% за графіком відповідає концентрації 9000 нг на пробу; тоді перехресна реактивність у даній тест-системі складе
2,5 ——— . 100% 9000 = 0,028%. Якщо крива для тестостерону не перетинає вказаний вище перпендикуляр, тестостерон в даній тест-системі не конкурує з кортизолом. Інший варіант обчислень відсотка перехресної реактивності (ПР) можна здійснити за формулою: 50% А ПР = ———— . 100%, 50% Б де 50% А – кількість однієї речовини, здатної зв’язати 50% ан- титіла (наприклад, 0,05 нг); 50% Б - кількість іншої речовини, що зв’язує 50% антитіла (наприклад 50 нг) в тій же тест-системі. У цьому випадку ПР для Б щодо до А складе: 50% А ПР = ———— . 100% = 0,01%, 50% Б Методи радіоімунологічного аналізу
Ви переглядаєте статтю (реферат): «Що представляє собою контроль якості тест-системи за специфічністю скріплення міченого ліганда» з дисципліни «Ветеринарна радіологія»
