Исследование генетических закономерностей наследования количественных признаков в селекционных экспериментах и при сравнении инбредных линий обеспечивает как бы базис для оценки наследования сложных признаков поведения. Эти методы не могут ответить на вопрос о числе генов, обеспечивающих генетическую изменчивость по данному признаку и, тем более, об их локализации. Метод рекомбинантных инбредных линий (РИЛ), разработанный Н. Бейли еще в 70-е годы (ВаИу, 1971), в целом ряде случаев позволяет выявить участие небольшого числа "главных" генов (т.е. генов, которые обеспечивают наибольший вклад в изменчивость данного полигенного признака), а также дать информацию об их локализации на хромосоме. Рекомбинантные инбредные линии не следует путать с линиями коизогенными (идентичными по генотипу, за исключением некоего локуса, в котором произошла мутация) и линиями конгенными (идентичными по генотипу за исключением некоего локуса с геном-маркером, введенным в генотип специальными скрещиваниями), которые были кратко описаны выше (см.: 8.6.4.1). РИЛ получают на основе популяции гибридов второго поколения, в свою очередь полученных от скрещивания гибридов первого поколения двух инбредных линий, контрастных по изучаемому признаку. Инбредные линии, как известно, гомозиготны по всем локу-сам. Гибриды первого поколения двух неродственных между собой инбредных линий гетерозиготны по всем аллелям, а все особи генетически идентичны друг другу. У гибридов второго поколения происходит расщепление (1:2:1) по каждому гену. Путем инбридинга (братско-сестринского скрещивания), начатого с особей-гибридов второго поколения и осуществляющегося в течение обычно 10–12 поколений, получают серию новых инбредных линий, гомозиготных по всем локусам. Это и есть рекомбинантные инбредные линии. Каждая из них представляет собой "зафиксированный" в гомозиготном состоянии один из вариантов расщепления признаков, т.е. результат серии событий расщепления и рекомбинации при формировании гибридов второго поколения. Если про обычные инбредные линии можно сказать, что каждая из них представляет собой некий гомозиготный генотип, повторенный неограниченное число раз, то каждая из РИЛ данной серии – это также воспроизведенный многократно и зафиксированный в гомозиготной форме вариант перекомбинации аллелей двух линий в том виде, как это произошло у гибридов второго поколения. При этом, поскольку внутри каждой линии все животные идентичны друг другу генетически, линии можно сравнивать как между собой, так и с родительскими линиями. В случаях, когда взятые в исследование исходные инбредные линии различаются по аллелям какого-то интересующего нас гена, половина новых линий будет гомозиготна по одному его аллелю (от родителя А), а вторая половина – по другому аллелю (от родителя В}. Ясно, что в этом случае мы можем обнаружить две группы (два "кластера") новых линий. Если эти кластеры по значению интересующего нас признака не перекрываются между собой, это четко свидетельствует о его моногенном наследовании, а именно такие случаи можно анализировать далее методом РИЛ. И наоборот, если у набора РИЛ обнаруживается непрерывное распределение значений признака, это свидетельствует о полигенном характере наследования. В последнее время разработан метод, позволяющий анализировать и такие случаи. Это метод картирования QTL (см.: 8.6.6.4). В случаях, когда данная группа РИЛ, тестированная на проявление интересующего нас признака, показывает бимодальное распределение его величин, т.е. если признак имеет моногенное наследование, вступает в действие следующая процедура. Характер распределения значений изучаемого признака в нашей группе РИЛ (в англоязычной литературе это – strain distribution pattern, SDP), сопоставляется с SDP других признаков, которые контролируются уже ранее картированными генами, т.е. генами, чья локализация на хромосомах известна (часто это гены тканевой совместимости), и которые в данном случае выполняют роль маркеров. Если такие SDP совпадают, имеются основания говорить о локализации гена, ответственного за формирование интересующего нас признака достаточно близко к маркеру. Близкое расположение этих двух генов предполагается потому, что в ходе гибридизации и последующего инбридинга хромосомы претерпевают несколько крос-синговеров, и сходное распределение двух генов – сходные SDP- могут обнаружиться только при близком их топографическом расположении.
Ви переглядаєте статтю (реферат): «МЕТОД РЕКОМБИНАНТНЫХ ИНВРЕДНЫХ ЛИНИЙ» з дисципліни «Основи етології і генетики поведінки»
