Для розділення вільного і зв’язаного ліганда ши- роко застосовується неспецифічна адсорбція біологічних молекул на поверхні частинок. При цьому адсорбуються тільки молекули вільного ліганда, а молекули зв’язуючого агента і його комплексу з лігандом такою здатністю не володіють. Найбільш широко за- стосовуються методи адсорбції, в яких використовуються акти- воване вугілля або силікати. З існуючих препаратів активованого вугілля найбільш ефективним є вугілля марки Norit з максималь- ними розмірами частинок 60 мкм. До силікатів, що також використовуються для розділення, відносяться тальк, Quso G-32 (Саlbiochem), фулерова земля і фло- ризил. За принципом дії силікати практично не відрізняються від активованого вугілля; те ж відноситься до переваг та недоліків цього адсорбенту. Гідроксилапатит, що використовується в деяких системах, зокрема при радіоімунологічному аналізі стероїдів, адсорбує не вільний, а зв’язаний ліганд. До переваг адсорбційних методів відносяться висока швид- кість, простота і невелика вартість, до недоліків - низька ефектив- ність. При їх використанні доводиться ретельно підбирати умо- ви аналізу (рН, температура, іонна сила, концентрація білка), щоб уникнути адсорбції комплексу. Якщо комплекс володіє великою швидкістю дисоціації, то адсорбент може конкурувати зі зв’язую- чим реагентом за ліганд і спричиняти розщеплення комплексу. Тому необхідне дуже точне дотримання часу інкубування, центрифугу- вання і перенесення надосадової рідини в пробірку для радіометрії; розливати реагенти треба дуже швидко, щоб варіації періоду ад- сорбції в різних пробірках були мінімальними; всі стандарти і про- би, що тестуються, необхідно центрифугувати одночасно.
Ви переглядаєте статтю (реферат): «Адсорбція» з дисципліни «Ветеринарна радіологія»
