Які чинники слід враховувати при виборі проби біологічних рідин для тестування
При виборі виду проби біологічних рідин потрібно врахову- вати таке: 1) при отриманні сироватки крові виникає небезпека того, що при відстоюванні крові з еритроцитів інтенсивно звільняють- ся протеолітичні ферменти, які можуть зруйнувати речовину, що визначається, і пошкодити його мічений аналог під час інкубуван- ня. Тому для визначення вмісту білкових сполук краще готувати плазму крові; 2) при отриманні плазми часто використовують гепарин або цитрат; перший блокує з’єднання антигену з антитілом, другий істотно змінює кислотність середовища, до якого надзвичайно чутливі радіоімунологічні реакції. Тому в суху центрифужну про-376 бірку бажано додавати 50 мг ЕДТА на 5 мл крові (1:100); відразу після відбору кров перемішати з ЕДТА і центрифугувати. ЕДТА є слабим антикоагулянтом, блокатором протеолітичних ферментів і складовою частиною багатьох буферних сумішей; 3) більшість речовин біологічного походження за низької температури більш стабільні, ніж при кімнатній, тому їх звичайно зберігають у замороженому стані. Заморожування потрібно про- вести дуже швидко, інакше в процесі охолоджування речовини можуть руйнуватися. У звичайних побутових холодильниках за- морожування відбувається повільно, в зв’язку з чим речовини, що охолоджуються, можуть руйнуватися через утворення вели- ких кристалів льоду; найкраще заморожування провести з самого початку в рідкому азоті – в цьому середовищі процес охолоджу- вання йде набагато швидше і не супроводжується руйнуванням охолоджених речовин; 4) розмороження і повторне заморожування пошкоджують практично всі біологічні проби. Існує помилкова думка про те, що така дія не впливає на тиреоїдні та стероїдні гормони. Однак по- трібно пам’ятати, що основний пул стероїдних і тиреоїдних гор- монів циркулює під “захистом” транспортних білків, які, як і всі інші білки, не витримують температурних перепадів та, руйную- чись, перестають “захищати” гормони. Останні, звільняючись, не- гайно включаються в метаболічний ланцюг, що, в кінцевому ре- зультаті, веде до спотворення істинної картини; 5) хімічне оточення, в якому знаходиться препарат, також є важливим чинником. При зберіганні білків у розчинах, концен- трація цих білків завжди повинна бути більшою від 1 мг/мл. Відо- мо, наприклад, що розбавлена антисироватка втрачає активність набагато швидше, ніж нерозбавлена. Молекули деяких речовин біологічного походження, таких, наприклад, як АКТГ, особливо легко руйнуються при окиснен- ні, тому їх треба зберігати в присутності якого-небудь відновни- ка або в атмосфері, що не містить кисню (наприклад, в атмосфе- рі азоту).
Ви переглядаєте статтю (реферат): «Які чинники слід враховувати при виборі проби біологічних рідин для тестування» з дисципліни «Ветеринарна радіологія»
