Статистика
Онлайн всього: 5 Гостей: 5 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
ИССЛЕДОВАНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУНИТЕТА ПРИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ, СОЧЕТАННОЙ С ХРОНИЧЕСКИМ ВИРУСНЫМ ГЕПАТИТОМ С
|
| 08.11.2014, 13:27 |
| В последние годы распространение инфекции иммунодефицита человека в России было связано, в первую очередь, с большой частотой регистрации случаев выявления ВИЧ-инфицированных среди лиц, использующих интравенозное введение наркотических веществ. [1,2,4] В данной популяции одновременно с вирусом иммунодефицита человека распространяются вирусы гепатитов с парентеральным механизмом передачи (гепатиты В, D и С). [2,4] На территории нашей страны антитела к вирусу гепатита С выявляется у 75-95% лиц, заразившихся ВИЧ при внутривенном введении психоактивных веществ [1,3].
Целью настоящей работы явилось исследование показателей иммунного статуса больных инфекцией иммунодефицита человека, сочетанной с хроническим вирусным гепатитом С ( ХВГС).
Материалы и методы. Под наблюдением находилось 50 больных, среди них было 32 мужчины и 17 женщин в возрасте от 18 до 30 лет. I группа составила 30 больных ВИЧ-инфекцией, сочетанной с хроническим гепатитом С (ко-инфекция), а во II группу были включены 20 больных ВИЧ-инфекцией без сопутствующего ХВГС (моноинфекция). Диагноз у всех обследованных подтвержден серопозитивными результатами на ВИЧ в ИФА и в иммуноблоте. Верификация ХВГС проводилась выявлением серопозитивных результатах анти HCV в ИФА в скрининговых и подтверждающих тест системах, на основании клинико-эпидемиологического и параклинического обследования.
Изучение клеточных субпопуляций лимфоцитов осуществлялось методом иммунофенотипирования с помощью моноклональных антител, меченых двухцветной флюоресцентной меткой, на лазерном клеточном сортере-анализаторе «Весkmан Coulter Epixc XL». Уровень сывороточных цитокинов (ФНО-α, ИФН-γ, ИЛ-4) и концентрацию иммуноглобулинов (IgA, IgM, IgG, IgE) в сыворотке крови определяли методом ИФА. Результаты исследования иммунологических показателей больных ВИЧ-инфекцией сравним с соответствующими значениями практически здоровых лиц, состоящих из 30 обследованных доноров.
Результаты и обсуждение. Исследование показателей Т-клеточного звена иммунитета у больных ВИЧ-инфекцией, сочетанной с ХВГС позволило установить тенденцию повышения (p>0,05) количества Т-лимфоцитов с фенотипом CD3+ (80,19±2,63%; 1,88±0,20х109/л) по сравнению с контрольной группой обследованных лиц (77,17±1,45%; 1,66±0,09х109/л). Аналогичные изменения (p>0,05) в содержании CD3+ лимфоцитов (81,17±1,76%; 1,63±0,11х109/л) наблюдаются также у больных моноинфекцией.
Полученные результаты иммунофенотипирования лимфоцитов (CD3+CD4+), включающих Т-хелперную субпопуляцию клеток, у больных ко-инфекцией (19,78±1,45%; 0,47±0,05 х109/л) свидетельствуют о значительном уменьшении их количества (р<0,001), что соответственно в 2,2 и 2,1 раза меньше контрольного значения здоровых лиц (44,08±1,13%; 0,98±0,06х109/л). Следует отметить, что у больных моноинфекцией снижение содержания (CD3+CD4+) лимфоцитов (35,17±2,26%; р<0,001; 0,71±0,05х109/л; р<0,001) отмечалось в меньшей (в 1,3 раза) степени. Установлено более выраженное (р<0,001) уменьшение количества иммунокомпетентных клеток с фенотипом (CD3+CD4+) у больных ВИЧ-инфекцией, ассоциированной с ХВГС, чем у больных моноинфекцией. Иммунофенотипирование мононуклеарных (CD3+CD8+) клеток, включающих Т-цитотоксические лимфоциты, у больных с сочетанной патологией позволило установить, что их количество (58,86±1,98%; 1,38±0,14х109/л) существенно увеличивалось (р<0,001) и соответственно в 2,5 и 2,7 раза превышало нормативные значения (23,76±0,75%; 0,50±0,03х109/л). Аналогичные данные увеличения количества CD3+CD8+ лимфоцитов отмечены и у больных моноинфекцией (47,21±1,86%; 0,98±0,11х109/л), но эти изменения имели менее выраженный характер (р<0,001) и превышали в 2 раза показатели нормы. Следует указать, что более значительное увеличение количества Т-цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+) наблюдалось при ко-инфекции, чем при моноинфекции, но эти различия (р>0,05) изменения не имели статистически достоверный характер. Сравнительный анализ содержания лимфоцитов с фенотипом (CD3- CD16+CD56+) (7,11±0,89%; 0,17±0,02х109/л; р<0,001) у больных с микст-патологией показал, что количество естественных клеток киллеров уменьшалось в 1,8 и 1,7 раза по сравнению с контролем (12,54±1,26%; 0,30±0,03х109/л). Необходимо отметить что, при моноифекции у обследованных больных наблюдалось более выраженное (в 2,7 и 3 раза) уменьшение (CD3-CD16+CD56+) лимфоцитов (4,60±0,55%; р<0,001; 0,10±0,01х109/л; р<0,001) по сравнению с соответствующими нормативными значениями.
Определение методом иммунофенотипирования количества активированных Т-лимфоцитов, экспрессирующих HLA-DR-антиген (CD3+HLA-DR+) позволило установить значительное увеличение (р<0,001) их содержания у больных ко-инфекцией (14,19±1,79%; 0,34±0,05х109/л), которое многократно (в 5,6 раз) превышало нормативные значения (2,55±0,17%; 0,06±0,01х109/л). Аналогичные данные получены и при изучении содержания активированных Т-лимфоцитов у больных моноинфекцией (15,45±2,59%; р<0,001; 0,33±0,08х109/л; р<0,001), что соответственно в 6,1 и 5 раз больше показателей здоровых лиц (2,55±0,17%; 0,06±0,01 х109/л).
Исследование иммунокомпетентных клеток экспрессирующих активационный маркер рецептора для трансферрина (CD71+) у обследованных основной группы, выявило достоверное (р<0,01) увеличение их содержания (2,62±0,33%), а абсолютное количество CD71+ позитивных лимфоцитов (0,05±0,01х109/л) имело тенденцию повышения (p>0,05). Содержание CD71+ позитивных клеток у больных моноинфекцией (2,95±0,61%; р<0,05; 0,06±0,01х109/л; р>0,05) имело аналогичный характер изменений по сравнению с нормативными показателями (1,59±0,13%; 0,04±0,003х109/л). Сравнительное изучение содержания субпопуляции Т-цитотоксических лимфоцитов, экспрессирующих CD38 (CD8+CD38+) у больных ко-инфекцией (24,57±3,64%; 0,69±0,14х109/л) и моноинфекцией (23,34±2,76%; 0,42±0,06х109/л) выявило значительное (р<0,01) их увеличение, которое превышало контрольное значение (4,08±0,61%; 0,07±0,01х109/л) при микст-патологии (в 6 и 9,9 раза) и моноинфекции соответственно(в 5,7 и 6 раз).
Определение количество всех лимфоцитов, экспрессирующих активационный маркер CD38+, позволило установить умеренное снижение их содержания у больных основной группы (74,04±4,89%; р<0,05; 1,39±0,14х109/л; р<0,001). Изменение CD38+ позитивных лимфоцитов при моноинфекции (78,82±9,69%; р>0,05; 1,54±0,21х109/л; р<0,01) наблюдалось в меньшей степени по сравнению с показателями контрольной группы (83,68±2,32%; 2,09±0,10х109/л). Полученные данные анализа количества лимфоцитов, экспрессирующих CD95+, индуцирующий апоптоз клеток, у больных ко-инфекцией (32,00±3,34%; 0,71±0,07х109/л) свидетельствуют о наличии тенденции увеличения (р>0,05) их числа по сравнению с нормой (22,58±0,99%; 0,56±0,03х109/л). При моноинфекции относительное содержание CD95+ позитивных лимфоцитов (36,86±5,27%; р<0,01) достоверно увеличивалось, в то время как абсолютное количество этих клеток (0,67±0,09х109/л) имело только тенденцию к повышению (р>0,05). Исследование количества лимфоцитов, экспрессирующих рецепторы фактора некроза опухоли (ФНО-() при ВИЧ-инфекции, сочетанной с ХВГС (2,14±0,67%), вывило достоверное (р<0,01) увеличение их содержания по сравнению с нормой (0,01±0,01%).
Следует также отметить, что при моноинфекции у обследованных число лимфоцитов, экспрессирующих ФНО-(, также увеличивалось (1,16±0,87%), но достоверно не отличалось (р>0,05) от контрольных значений. Определение содержания мононуклеарных клеток, экспрессирующих рецепторы ИФН-γ, индуцированные Тh1-лимфоцитами, у больных ко-инфекцией (0,66±0,31%) установило достоверное (р<0,05) увеличение их числа при значениях нормы (0,04±0,02%). Отмечается также, увеличение количества лимфоцитов, экспрессирующих рецепторы ИФН-γ у больных моноинфекцией (0,21±0,10%), но повышение их содержания было статистически не достоверно (р>0,05).
Изучение уровня сывороточного ФНО-( у больных обследованных групп свидетельствует о значительном (р<0,001) увеличении их значений при микст-патологии (8,02±0,54 пг/мл), чем при моноинфекции (3,52±0,12 пг/мл; р<0,01), превышающий соответственно в 3,9 и 2,3 раза показатели нормы (2,06±0,06пг/мл). Увеличение количества сывороточного ФНО-(, индуцированного клетками макрофагально-моноцитарного звена, при ко-инфекции отмечалось в достоверно (р<0,001) большей концентрации по сравнению с его уровнем при моноинфекции.
Изучение содержания сывороточного ИФН-γ, продуцируемого Тh1-лимфоцитами, у больных с сочетанной патологией, позволило установить, что при ко-инфекции количество этого цитокина (7,86±0,47 пг/мл) значительно (в 2,2 раза) уменьшалось (р<0,001) по сравнению с нормой (17,30±0,51 пг/мл). Снижение уровня сывороточного цитокина ИФН-γ у больных моноинфекцией (12,17±0, 89 пг/мл; р<0,001) отмечалось в меньшей степени (в 1,5 раза) и было достоверно выше (р<0,001), чем у больных ко-инфекцией. Анализ результатов исследования сывороточного ИЛ-4, индуцированного Тh2-лимфоцитами, при микст-патологии показал, что уровень этого цитокина (35,65±1,96 пг/мл; р<0,001) у больных в 3,6 раза превышал показатели нормы (9,80±0,30пг/мл). Повышение концентрации ИЛ-4 у больных моноинфекцией (30,72±2,01пг/мл) наблюдалось в меньшей степени и в 1,2 раза превышало уровень контрольной группы.
Определение количества В-лимфоцитов (CD19+) у больных инфекцией вирусом иммунодефицита человека, сочетанной с ХВГС, позволило установить достоверное (р<0,001) снижение относительного содержания (4,35±0,43%), а абсолютное их количество (0,10±0,01х109/л), уменьшалось в меньшей степени (р>0,05) по сравнению с нормой (8,81±0,58%; 0,20±0,07х109/л). У больных моноинфекцией наблюдалась аналогичная динамика изменения содержания CD19+ лимфоцитов (4,26±0,62%; р<0,001; 0,08±0,01х109/л; р>0,05).
Исследования концентрации иммуноглобулинов классов А, М, G и Е позволило установить поликлональную активацию В-лимфоцитов у больных ВИЧ-инфекцией, о чем свидетельствует их высокий уровень. Содержание IgA (4,99±0,33г/л), IgM (4,56±0,31г/л), IgG (26,18±1,62г/л) и IgE (143,40±13,41МЕ/мл) у больных с микст-патологией значительно превышало (в 2,5; 2,5; 1,9 и в 4,2 раза) соответственно уровни контрольной группы здоровых лиц (IgA - 1,96±0,11г/л; IgM – 1,84±0,12г/л; IgG – 13,79±0,86г/л; IgE 33,81±1,44МЕ/мл). Следует отметить, что у больных моноинфекцией повышение концентрации иммуноглобулинов наблюдалось в меньшей степени (IgA – 1,90±0,18 г/л; р>0,05; IgM – 2,22±0,16 г/л; р>0,05; IgG – 16,55±1,23 г/л; р>0,05; IgE - 84,16±3,96 МЕ/мл; р<0,001). Сравнительный анализ изученных иммуноглобулинов у обследованных I и II групп показал, что у больных ко-инфекцией концентрация IgA, IgM, IgG и IgE достоверно (р<0,001) превышала их уровни у обследованных больных моноинфекцией. Сравнительный анализ изученных показателей Т-клеточного звена больных ВИЧ-инфекцией, ассоциированной с ХВГС и моноинфекцией позволил установить их выраженные количественные и функциональные нарушения. Характерными для ВИЧ-инфекции изменениями являются значительное уменьшение количества Т-хелперов (CD3+CD4+) и естественных клеток киллеров (CD3-CD16+CD56+). Противоположный характер изменений в сторону увеличения регистрируется в содержании Т-цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+) и лимфоцитов, экспрессирующих активационные антигены (CD3+HLA-DR+; CD71+; CD8+CD38+), в том числе CD95+клеток, индуцирующих апоптоз. У больных ко-инфекцией наблюдается более выраженная степень экспрессии ФНО-( и ИФН-γ на лимфоцитах, индуцируемых вирусом иммунодефицита человека. Особое значение имеет снижение уровня сывороточного цитокина Тh1-клеток - ИФН-γ при ВИЧ-инфекции, наиболее выраженное у больных с микст-патологией. Важным моментом является также,более выраженное повышение содержания сывороточного цитокина ФНО-( у больных с ко-инфекцией, чем при моноинфекции. Аналогичная направленность изменения цитокина Тh2–клеток – ИЛ-4 наблюдается при ВИЧ-инфекции, особенно при ее сочетанном течении с ХВГС. Результаты исследований выявили значительную В-лимфоцитопению и поликлональную активацию CD19+клеток, которая характеризовалась повышенным содержанием IgA, IgM, IgG и IgE, более выраженным при микст-патологии.
В заключении следует отметить, что при проведении сравнительного изучения некоторых иммунологических показателей установлены наиболее информативные прогностические критерии быстрого прогрессирования ВИЧ-инфекции у больных с ХВГС. К ним относится значительное уменьшение количества Т лимфоцитов,включающих хелперную субпопуляцию клеток(CD3+CD4+), увеличение числа Т-цитотоксических лимфоцитов, экспрессирующих CD38 (CD8+CD38+) и лимфоцитов с рецепторами Fas-апоптоза CD95+, повышение содержания сывороточных цитокинов (ФНО-(, ИЛ4) и снижение уровня ИФН-γ.
|
| Категорія: Актуальні проблеми інфекційної патології | Додав: koljan
|
| Переглядів: 570 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
