Статистика
Онлайн всього: 13 Гостей: 13 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
Пролиферативный ответ лимфоцитов периферической крови в зависимости от интенсивности инвазии у больных хроническим описторхозом
|
| 08.11.2014, 11:32 |
| При изучении популяционного состава лимфоцитов периферической крови у больных описторхозом большинство исследователей подчеркивают прямую заинтересованность в патогенезе этого заболевания клеточных факторов иммунитета и, прежде всего, Т-лимфоцитов [5, 6], однако комплексного изучения зависимости состояния пролиферативной функции лимфоцитов от интенсивности инвазии до сих пор не проводилось.
Цель настоящей работы заключалась в изучении клеточного иммунного ответа, стимулированного специфическими гельминтными антигенами, неспецифическими бактериальными антигенами или митогенами, у больных хроническим описторхозом в зависимости от интенсивности инвазии.
Материалы и методы. Проведено обследование 87 больных хроническим описторхозом в стадии обострения (возраст 34,3(8,1 лет). Диагноз был подтвержден копроовоскопически. Интенсивность инвазии определяли по методу Столла [1]. В зависимости от интенсивности инвазии все больные были распределены на две группы. Группу I (42 человека), имевшую низкую интенсивность инвазии (до 1000 яиц/г фекалий) и группу II (45 человек), у которой была выявлена высокая интенсивность инвазии (более 1000 яиц/г фекалий). Контрольная группа включала 33 клинически здоровых лиц, не имевших описторхоз, а также другие гельминтные инвазии и вирусные гепатиты В или С (возраст 30,3(5,4 лет).
В проведенных нами исследованиях использовался яичный антиген (ЯАГ) и соматический (САГ) описторхов, который получали в соответствии с методом, описанным А.Т. Котелкиным с соавт. [3].
Для получения культур мононуклеарных клеток использовали гепаринизированную венозную кровь (20 МЕ/мл). Мононуклеары получали центрифугированием лейковзвеси на градиенте плотности фиколла-верографина («Pharmacia», Швеция) по методу M. Jondal с соавт. [8]. Для оценки пролиферативной функции мононуклеарных клеток периферической крови с помощью реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) были использованы специфические антигены описторхов (ЯАГ и САГ) в дозе 20 мкг/мл, микобактериальный антиген (МАГ, очищенный белковый дериват туберкулина, «Sigma», США) в дозе 10 мкг/мл, а также митогены фитогемагглютинин (ФГА) в дозе 10 мкг/мл («Difco», США) или конконавалин-А (Кон-А, «Sigma», США) в дозе 20 мкг/мл [4]. Культуры лимфоцитов инкубировали 5 суток, за 16 часов до окончания культивирования в пробирки добавляли 1 мкКи 3H-тимидина. После чего измеряли радиоактивность с помощью сцинтилляционного счётчика. Для оценки трансформации лимфоцитов использовали индексы стимуляции (ИС = [число импульсов/мин в стимулированных культурах] / [число импульсов/мин в не стимулированных культурах] ).
Оценку различий между выборками осуществляли с использованием t-критерия Стъюдента. Различия сравниваемых результатов (M(m, где M – выборочное среднее, m – ошибка среднего) считались достоверными при достигнутом уровне значимости p < 0,05. Для выявления зависимостей между изучаемыми параметрами проводили ранговую корреляцию Спирмена [2].
Результаты и обсуждение. В настоящей работе у больных хроническим описторхозом, имеющих различную интенсивность инвазии, проведена оценка пролиферативного ответа мононуклеарных клеток периферической крови на специфические антигены описторхов, антиген микобактерий и неспецифические митогены. Установлено, что пролиферативный ответ мононуклеарных клеток периферической крови на неспецифические митогены (Кон-А и ФГА), а также на микобактериальный антиген (МАГ) у больных с высокой интенсивностью инвазии был достоверно ниже (p < 0,01), по сравнению с соответствующими показателями в группе с низкой интенсивностью инвазии и у контрольных лиц (таблица 1). Более того, пролиферативный ответ мононуклеарных клеток на специфические антигены O. felineus (ЯАГ и САГ) у больных из группы II оказался существенно слабее, чем в группе I (p < 0,01). У многих больных, имевших высокую интенсивность инвазии, мононуклеарные клетки не смогли ответить на паразитарные антигены (22 из 45 человек не дали пролиферативный ответ на ЯАГ и 26 из 45 не ответили на САГ). Критерием отсутствия пролиферативного ответа мононуклеарных клеток на специфические антигены у больных послужило его сравнение с оценкой ИС пролиферации этих клеток на ЯАГ и САГ у здоровых людей (не более M ( 2(, где M ( выборочное среднее у здоровых, ( - стандартное отклонение). Кроме того, уровень пролиферации мононуклеарных клеток в ответ на САГ был достоверно ниже, по сравнению с ответом на МАГ (p < 0,05).
Таким образом, в данной работе показано, что пролиферативный ответ мононуклеарных клеток на специфические паразитарные антигены (ЯАГ и САГ) у больных хроническим описторхозом, имевших высокую интенсивность инвазии (группа II), был значительно подавлен, по сравнению с соответствующим ответом этих клеток у больных с низкой интенсивностью инвазии (группа I). Аналогичные исследования пролиферативного ответа мононуклеарных клеток на стимуляцию специфическими паразитарными антигенами у больных шистосомозом с инвазией Schistosoma mansoni или S. haematobium показали наличие обратной корреляционной зависимости между пролиферацией клеток и интенсивностью инвазии, что также свидетельствовало о том, что больные с менее выраженной степенью инвазии, как правило, имеют более активный лимфопролиферативный ответ на антигены гельминтов [7]. Вместе с тем, в этих исследованиях не было зафиксировано никаких существенных различий в реактивности лимфоцитов в ответ на неспецифические бактериальные антигены (очищенный дериват туберкулина и столбнячный токсин) или митогены между группами больных с различной интенсивностью инвазии [7].
Однако, в настоящей работе было показано, что высокая интенсивность инвазии у больных хроническим описторхозом сопровождается угнетением лимфопролиферативного ответа не только на специфические гельминтные антигены, но и на микобактериальный антиген (МАГ) и митогены (Кон-А и ФГА). Известно, что преобладание цитокинового профиля Т-хелперов типа 2, что считается характерным для хронической стадии гельминтных инвазий, может сопровождаться снижением эффективности вакцинации у больных паразитозами, включая подавление Т-клеточного иммунного ответа на вакцину БЦЖ [9, 10].
Выводы.
Пролиферативный ответ мононуклеарных клеток на специфические паразитарные антигены у больных хроническим описторхозом, имевших высокую интенсивность инвазии, был значительно подавлен, по сравнению с соответствующим ответом этих клеток у больных с низкой интенсивностью инвазии.
У больных хроническим описторхозом тяжелая инвазия сопровождается угнетением лимфопролиферативного ответа не только на специфические гельминтные антигены, но и на неспецифический микобактериальный антиген и митогены (Кон-А и ФГА).
|
| Категорія: Актуальні проблеми інфекційної патології | Додав: koljan
|
| Переглядів: 518 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
