Статистика
Онлайн всього: 1 Гостей: 1 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
Выявление энтеровирусной РНК в миокарде больных ДКМП
|
| 29.10.2014, 08:48 |
| Большое внимание уделялось поискам доказательств присутствия вирусного возбудителя в миокарде больных ДКМП. За обнадеживающими сообщениями о двух случаях обнаружения в ЭМБ этих пациентов вирусоподобных частиц (M. Gardner с соавт. 1967, Р. Lowry с соавт., 1982) и в одном — вирусного антигена (С. Kawai, 1971) последовали, однако, многочисленные отрицательные результаты (Т. Takatsu, 1978; Н. Bolte с соавт., 1982; К. Daly с соавт., 1984, и др.).
Следует отметить, что отсутствие вируса в миокарде не дает достаточных оснований для исключения вирусной этиологии заболевания, поскольку, как было показано в экспериментальной модели Коксаки В миокардита мышей, возбудитель определяется в миокарде только в первые 5-7 дней после заражения (Е. Ф. Бочаров и О. П. Шестенко, 1984; A. Matsumori и С. Kawai, 1982;
M. Reyes и A. Lerner, 1985, и др.). Существенное значение имеет также несовершенство рутинных морфологических методов выявления вирусных частиц, что было блестяще доказано более поздними исследованиями с использованием современных технологий молекулярной биологии.
Первые прямые доказательства связи ДКМП с вирусной инфекцией были получены N. Bowles с соавторами (1986) при помощи специально синтезированной клонированной ДНК, комплементарной к РНК вирусов Коксаки группы В, что позволило обнаружить в биоптатах миокарда примерно 50 % больных острым миокардитом и ДКМП вирусспецифическую РНК. Сходные результаты были получены у больных с ДКМП другими исследователями (V. Wiegand с соавт., 1990; L. Archard с соавт., 1991), использовавшими более специфические молекулярные маркеры к вирусам Коксаки В2 и ВЗ. При этом вирусная РНК не была обнаружена ни в одном из исследованных здоровых сердец.
Более чувствительным методом выявления нуклеотидов является гибридизация in situ, позволяющая обнаруживать отдельные инфицированные вирусами клетки в массе непораженных. При этом комплементарная ДНК или РНК инкубируется непосредственно со срезами ткани миокарда, а не с предварительно выделенной из нее РНК (Р. Keeling и S. Тгасу, 1994). С помощью этого метода энтеровирусная РНК была выявлена как в кардиомиоцитах, находящихся в очагах хронического воспаления, так и в мышечных волокнах с признаками дистрофии и гипертрофии при отсутствии в ЭМБ явлений активного воспаления (R. Kandolf с соавт., 1991), что подтверждает возможность перехода острого или подострого вирусного миокардита в ДКМП.
Еще большую точность обнаружения вирусной РНК в ЭМБ обеспечивает использование ферментативного усиления клонированной ДНК, комплементарной к РНК вирусов Коксаки, содержащихся в ткани сердца, с помощью термостабильной ДНК-полимеразы.
С использованием этого метода, получившего в последние годы все большее распространение, вирус-специфическая РНК была обнаружена в ЭМБ 7-30 % больных миокардитом, в том числе в стадии заживления, и примерно такой же части больных ДКМП — 12-67 % (табл. 4), что может свидетельствовать о персистенции вируса. В то же время имеются также сведения об отрицательных результатах попыток обнаружения вирусной РНК в ЭМБ больных ДКМП, что, возможно, связано с очаговым характером инфицирования. С другой стороны, описаны и случаи выявления вирусного генома у здоровых лиц и больных другими сердечно-сосудистыми заболеваниями, в частности, ИБС. Последнее свидетельствует о том, что обнаружение вирусной РНК в миокарде не может служить неопровержимым доказательством активной инфекции или патогенности и может быть связано с интеркуррентной инфекцией, что поднимает вопрос о необходимости дифференцировать кардиовирулентные кардиотропные возбудители от авирулентных.
Имеются сведения о выявлении в ЭМБ больных ДКМП также последовательности нуклеотидов, специфичных для цитомегаловирусов (в 14-22 %, по данным: G. Friman с соавт., 1995 и U. Schonian с соавт., 1995) и РНК вируса гепатита С (A. Matsumori и S. Sasayama, 1996).
Персистенция энтеровирусов в миокарде больных ДКМП при отсутствии морфологических признаков воспаления, по-видимому, обусловлена образованием мутантов, утративших способность к ресинтезу структурных белков и репликации, возможно, в результате изменения специфичности РНК-полимеразы (L. Archard с соавт., 1991). Это, вероятно, отчасти объясняет невозможность выделения вирусов из биопсийного материала.
Представляет интерес обнаруженное относительно недавно неблагоприятное прогностическое значение наличия энтеровирус пой РНК в миокарде больных ДКМП. Так, по данным N. Bowles с соавторами (1989), вирусная РНК чаще выявлялась у больных с резко выраженной застойной сердечной недостаточностью, которым выполнялась трансплантация сердца. Н. Why с соавторами (1994) отметил связь ее обнаружения с повышенной летальностью в течение последующих 11-50 мес (25 % по сравнению с 4 % больных, у которых вирусная РНК не определялась). Подобное неблагоприятное влияние наличия в миокарде больных ДКМП вирусспецифической РНК на прогноз, возможно, связано с ее способностью вызывать повреждение кардиомиоцитов и, тем самым, прогрессирование миокардиальной дисфункции. Об этом может свидетельствовать выявление вирусной РНК у 4 из 16 больных ДКМП, у которых обнаруживалась фиксация в миокарде меченых индием-111 моноклональных антимиозиновых антител, при отсутствии случаев определения этой РНК среди аналогичных пациентов, у которых захват данного изотопа отсутствовал (V. Marti с соавт., 1996).
Таблица 4. Частота обнаружения специфичной для энтеровирусов РНК в миокарде больных ДКМП, миокардитом и в контрольной группе здоровых и больных другими сердечно-сосудистыми заболеваниями
Источник Метод определения Частота обнаружения вирусной РНК, %
ДКМП Миокардит Контрольная группа
N. Bowles с соавторами (1989) Клонирование 6/21 (29%)
1/19(5%)
L. Archard с соавторами (1991) » 35/82 (43%) 21/47 (47%) 0/39 (0%)
V. Wiegand с соавторами (1990) » 1/16 (17%) 0/8 (0%)
A. Easton и R.Eglin(1988) Гибридизация 6/13 (46%)
R.Kandolf и P.Hofschneider (1989) » 18/80 (23%)
0/53 (0%)
0. Jin с соавторами (1990) Ферментативное усиление с помощью ДНК-полимеразы 3/20 (15%) 2/28 (7%) 0/9(0%)
L. Weiss с соавторами (1992) » 5/11 (45%)
9/24(38%)
Р. Keeling с соавторами (1992) » 6/50 (12%)
13/75(17%)
J. Petitjean с соавторами (1992) » 30/45 (67%) 3/10 (30%) 25/50 (50%)
Н. Koide с соавторами (1992) » 8/25 (32%) 3/9 (33%)
Р. Muir с соавторами (1993) » 4/18 (22%)
2/15(13%)
М. Satoh с соавторами (1994) » 17/35 (49%)
0/10(0%)
S. Fujoka с соавторами (1996) » 6/31 (19%) 5/28 (18%) 5/23(22%)
J. Liljeqvist с соавторами (1993) » 0/35 (0%)
(0%)
М. Grasso с соавторами (1992) » 0/21 (0%)
0/20 (0%)
|
| Категорія: Кардіоміопатії | Додав: koljan
|
| Переглядів: 478 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
