Статистика
Онлайн всього: 7 Гостей: 7 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
Клонування генів гамма-інтерферону
|
| 27.09.2014, 21:06 |
| Клонування генів гамма-інтерферону виявилося
найскладнішим. По-перше, важко було індукувати продукування гамма-інтерферону. Препарати
мРНК із селезінки людини, в яких за допомогою бактеріального токсину було індуковано
продукування гамма-інтерферону, розділяли за розмірами і вводили різні фракції в ооцити Xenopus.
Було отримано 18S мРНК, продукт трансляції якої мав антивірусну активність. На її основі було
створено кДНК, яку ввели Е. соlі в складі космідного вектора. Рекомбінанти розмножували в
клітинах Е. соlі і досягали експресії. Клони використовували для селекції відповідного
хромосомного гена в бібліотеці кДНК людини у векторах на основі фага лямбда. Таким чином було
ідентифіковано і секвеновано ген гамма-інтерферону. Він містить 3 інтрони і 4 екзони, є унікальним
і міститься в єдиній копії в 12-й хромосомі. Відсутність інтронів у генах альфа- і бета-інтерферонів
має велике значення, оскільки вони синтезуються в інфікованій вірусом клітині, їх синтез не
залежить від сплайсингу, який в інфікованій клітині може бути порушений. 82
При отриманні гамма-інтерферону було показано, що він ефективно продукується рекомбінантними
клітинами (Е. соlі — 25 000 од/л, дріжджі - 1 000 000 од/л). На сьогодні відомі роботи із синтезу
гамма-інтерферону в клітинах мавп, однак зі значно меншим виходом.
|
| Категорія: Імунологія | Додав: koljan
|
| Переглядів: 595 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
