Статистика
Онлайн всього: 10 Гостей: 10 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
БІОТЕХНОЛОГІЧНІ ПРОДУКТИ, ЯКІ ВИКОРИСТОВУЮТЬ ДЛЯ ВПЛИВУ НА ІМУННУ СИСТЕМУ
|
| 27.09.2014, 21:05 |
| Родину білків, ідентифікованих у риб, птахів, рептилій і ссавців як антивірусних аґентів широкого
спектра дії, називають інтерферонами. Ці білки було виявлено під час вивчення вірусної
інтерференції (тварина, інфікована одним вірусом, є стійкою до інфікування іншим неспорідненим
вірусом). Інтерферони впливають на ріст клітин і функції імунної системи. Така дія інтерферонів на
клітини зумовлена змінами в метаболізмі, що виникають після зв'язування інтерферону зі
специфічним рецептором. Інтерферони досліджували переважно як антивірусні агенти. Вони
сприяють лікуванню застудних захворювань, гепатитів, оперізувального лишаю тощо. Вважають,
що при вірусній інфекції клітини синтезують інтерферон і секретують його в міжклітинний простір,
де молекули інтерферону зв'язуються з рецепторами сусідніх неінфікованих клітин. У клітині під
дією інтерферону дерепресуються мінімум два гени і починається синтез двох ферментів —
протеїнкінази, що фосфорилює рибосомальний білок, та факторів ініціювання, потрібних для
трансляції. Таким чином, трансляція мРНК пригнічується. Другий фермент каталізує утворення
короткого полімеру аденілової кислоти, яка активує латентну ендонуклеазу, що призводить до
деградації мРНК як вірусу, так і клітини-хазяїна. В будь-якому випадку кінцевим результатом дії
інтерферону є утворення бар'єра з неінфікованих клітин навколо осередку вірусної інфекції.
Про ефективність дії інтерферону in vivo свідчать досліди з уведення інфікованим мишам
антисироватки до власних інтерферонів. При цьому летальна доза вірусу була в кількасот разів
меншою, ніж у контрольній групі. Було показано, що інтерферони важливі не тільки для лікування,
а й для профілактики цілої низки захворювань.
Інтерферони як система білків мають значно ширшу біологічну дію. Ферменти, синтез яких
індукують інтерферони, здатні пригнічувати поділ клітин хазяїна, модулювати активність інших
клітин (наприклад, НК), тобто розглядаються як перспективні протипухлинні препарати.
Інтерферони утворюються не лише в організмі людини, а й у інших хребетних. Доведено, що
інтерферони є чітко видоспецифічними білками. Тому інтерферони тваринного походження не
вдається успішне застосовувати для лікування людини.
Інтерферони продукуються, як правило, у відповідь на дію різних стимуляторів. Ці стимулятори
називають індукторами інтерфероногенезу. Ними можуть бути віруси, хімічні речовини, а також
імунологічні взаємодії.
За антигенними властивостями інтерферони поділяють на альфа (лейкоцитарний); бета
(фібробластний); гамма (імунний).
У людини формується значна кількість підтипів альфа-інтерферону (нині відомо 23), і вони є
найсильнішими антивірусними агентами, тоді як ідентифіковано один основний тип людського
бета-інтерферону, який є сильним противірусним агентом. Людський гамма-інтерферон має
незначну подібність до альфа- і бета-інтерферонів. Він є модулятором імунної відповіді. Природні
молекули бета- і гамма-інтерферонів глікозильовані.
Отримання альфа-інтерферону. Перші спроби отримання інтерферонів було здійснено в середині
50-х років минулого століття. Першим способом отримання альфа-інтерферону було добування
його з клітин периферичної крові людини, активованих вірусом Сендай. Проте цей спосіб
характеризувався надзвичайно низьким виходом. За його допомогою отримували невеликі кількості
інтерферону, не придатні для широкомасштабного клінічного використання.
Нині застосовують два способи: генно-інженерний, за якого альфа-інтерферон експресується
культурою клітин Е.соlі, трансформованої вектором, в який вбудовано послідовність ДНК, що кодує
зрілий білок, та отримання інтерферонів у культурі лімфобластоїдних клітин. За цим способом
грубий матеріал з культури лімфобластоїдних клітин, попередньо активованих вірусом Сендай,
очищали на імунохроматографічних колонках (імуно-афінна хроматографія із моноклональними
антитілами, специфічними до альфа-інтерферону). У зв'язку з використанням для вироблення
інтерферону лімфобластоїдних клітин виникло кілька запитань з прриводу можливості
використання трансформованих клітин у біотехнологічних процесах виробництва медичних
препаратів. Деякі лінії, особливо отримані з клітин лімфоми Беркіта, є злоякісними. Використання
трансформованих клітинних ліній, особливо пухлинного походження, для виробництва медичних
препаратів було вперше застосовано саме для отримання альфа-інтерферону. На сьогодні
загальновизнаним є те, що перещеплювані лінії можна використовувати для виробництва
фармацевтичних препаратів у разі достатнього очищення кінцевого продукту та виконання певних
вимог.
Особливу увагу під час отримання інтерферонів з культур лімфобластоїдних клітин звертають на
можливу наявність у готовому продукті таких домішок:
1) біологічно активних сторонніх агентів (ДНК, білки, сторонні інфекційні агенти, ендогенні
ретровіруси). Ці агенти можуть міститися в неочищеному препараті, але не в готовому продукті;
2) матеріалів з культурального середовища, речовин, які використовують для посилення
продукування інтерферону, індукторів інтерфероногенезу, а також речовин, що використовувались
для очищення препарату.
Відразу після отримання перших партій синтетичного альфа-інтерферону його почали досліджувати
на можливість використання для лікування онкологічних захворювань.
Бета-інтерферон (фібробластний) синтезується фібробластами. Фібробласти легко підтримувати в
культурі, однак вони ростуть лише у вигляді моношару. Для збільшення площі поверхні у
ферментери вносять спеціальні гранули субстрату. Фібробластний інтерферон також досліджували
на можливість використання для лікування множинної мієломи, раку молочної залози.
Гамма-інтерферон (імунний) отримують при культивуванні Т-лімфоцитів людини за наявності
мітогенів. Ця технологія також є традиційною, її характеризують низький вихід, висока вартість
очищення та низька чистота отриманих препаратів. Усі надії на масштабне виробництво
інтерферонів покладають на технології рекомбінантних ДНК.
|
| Категорія: Імунологія | Додав: koljan
|
| Переглядів: 904 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
