Статистика
Онлайн всього: 9 Гостей: 9 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
ДНК-зонди
|
| 27.09.2014, 21:03 |
| Діагностичні засоби на основі аналізу генетичних структур, що визначають
індивідуальність кожного організму, ґрунтуються на принципі комплементарності нуклеотидів
(праймерів), штучно синтезованих людиною. Серед методів визначення специфічного зв'язування
таких зондів з геномом збудника перше місце за чутливістю посідає полімеразна ланцюгова реакція
(ПЛР), яка дає можливість визначити одну молекулу ДНК. ПЛР замінила традиційну гібридизацію,
що в класичному варіанті використовувала як ДНК-зонди фрагменти ДНК з нанесеною
індикаторною частиною. ПЛР — це штучний процес багаторазового копіювання (ампліфікації)
специфічної послідовності ДНК, що здійснюється in vitro. Копіювання ДНК при ПЛР здійснюється
спеціальним ферментом — ДНК-полімеразою, як і в клітинах живих організмів. ДНК-полімераза,
рухаючись по одному ланцюгу ДНК (матриці), синтезує комплементарну їй послідовність ДНК.
Важливо, що ДНК-полімераза не може почати синтез ланцюга ДНК «з нуля», їй потрібен короткий
«затравковий» ланцюг РНК чи ДНК, до якого вона може почати приєднувати нуклеотиди. Основний
принцип ПЛР полягає в тому, що реакція полімеризації (синтезу полімерного ланцюга ДНК з
мономерних нуклеотидних ланок) ініціюється специфічними праймерами (короткими фрагментами
«затравкової» ДНК) у кожному з безлічі повторюваних циклів. Специфічність ПЛР визначається
здатністю праймерів «упізнавати» чітко визначену ділянку ДНК і зв'язуватися з нею відповідно до
принципу молекулярної комплементарності.
Універсальність, висока чутливість і відносна простота виконання зробили метод ПЛР незамінним
для вирішення різних завдань клінічної діагностики, таких як пряме виявлення та ідентифікація
збудників захворювань, молекулярне типування і дослідження властивостей патогенних
мікроорганізмів, аналіз мутацій, пов'язаних з генетичними захворюваннями людини, ідентифікація
особистості людини тощо.
|
| Категорія: Імунологія | Додав: koljan
|
| Переглядів: 464 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
