Статистика
Онлайн всього: 10 Гостей: 10 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
Саузерн-блотинг (Southern blotting)
|
| 26.09.2014, 20:29 |
| Електрофоретичне розділення фрагментів ДНК дає змогу
визначити розміри кожного досліджуваного фрагмента. Для ідентифікації тих чи інших генетичних
фрагментів, розділених за допомогою електрофорезу, використовують метод Саузерн-блотингу.
Суть цього методу полягає в тому, що розділені електрофорезом фрагменти ДНК переносять на
мембрану і виявляють положення певного гена за допомогою гібридизації з радіоактивно міченим
зондом.
Для аналізу методом Саузерн-блотингу плазмідну ДНК розрізають рестриктазою і залежно від виду
рестриктази отримують певну кількість фрагментів ДНК. Фрагменти ДНК можна розділити в
електрофоретичному гелі відповідно до їхніх розмірів у зв'язку з тим, що в гелі дрібніші фрагменти
рухаються швидше. Розділені фрагменти ДНК переносять на нітроцелюлозну або нейлонову
мембрану, при цьому зберігається загальна схема їхнього взаємного розміщення в гелі. Положення
певного гена на мембрані визначають за допомогою радіоактивного зонда, комплементарного цьому
гену. ДНК зонда, що не зв'язалася, відмивають, а зв'язану з геном визначають радіоавтографією з
використанням рентгенівської плівки.
|
| Категорія: Імунологія | Додав: koljan
|
| Переглядів: 583 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
