Статистика
Онлайн всього: 3 Гостей: 3 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
Активированные клеточные онкогены, детектируемые трансфекцией
|
| 25.05.2014, 19:29 |
| Трансфекционный тест на онкогены. Некоторые из известных клеточных линий обладают способностью инкорпорировать экзогенную ДНК в свой хромосомный аппарат с такой эффективностью, что появляется возможность экспериментального введения гена (трансфекции) непосредственно в культуру тканей. Технология трансфекции обычно заключается в осаждении ДНК на поверхность клеток-мишеней фосфатом кальция с последующим поглощением ДНК внутрь клетки посредством пиноцитоза. Некоторые из поглощенных молекул ДНК транспортируются в клеточное ядро и интегрируются в хромосомную ДНК. Если трансфектированная ДНК содержит ген, который может экспрессироваться в клетке-реципиенте как доминантный селектируемый маркер, то клетки, экснрессирующие этот признак, могут быть обнаружены в культуре с эффективностью до одной клетки на каждые 105 событий трансфекции. Многие из вирусных онкогенов. (см. табл. 59-1) могут вызвать трансформации в тестах описанного типа. Трансформация такого рода имеет место как при использовании чистой онкогенной ДНК, так и при использовании хромосомной ДНК клеток, трансформированных ретровирусами.
Таблица 59-3. Онкогены, обнаруженные в опухолях человека трансфекцией клеток NiH/3ТЗ
Онкоген Опухоли или опухолевые линии клеток
с-гас" Линии клеток из, карциномы мочевого пузыря EJ/T24, карциномы легкого и карциносаркомы молочной железы
c-racк Карциномы легкого, толстой кишки, мочевого пузыря, поджелу-
гacN Нейробластома, фибросаркома, промиелоцитарный и острый мие-лоцитарный лейкоз, лимфома Беркитта и карцинома толстой кишки
HuBlym-1 Несколько линий клеток из лимфомы Беркитта
Tlym-1 Линии клеток из Т-клеточной лимфомы'
Клонированный ген Tlym-1 мышиного происхождения. Судя по паттернам инактивации рестриктазами, аналогичный трансформирующий ген активирован в линиях из Т-клеточных лимфом человека.
С помощью данной технологии можно обнаружить также активированные клеточные онкогены в ДНК опухолей, вирусная природа которых не доказана. Например, трансформирующие гены содержатся в ДНК химически трансформированных клеток животных и в ДНК клеток разнообразных опухолей человека и животных нативного происхождения. Нормальная высокомолекулярная ДНК человека не трансформирует клеток, однако трансформирующие гены можно активировать фрагментацией нормальной клеточной ДНК. Эти результаты подтверждают концепцию об активации протоонкогенов нормального генома при формировании опухоли, но они ничего не говорят о том, является ли активация трансформирующих генов причиной или следствием неопластического фенотипа. Хотя лишь небольшая часть ДНК опухолей человека проявляет трансформирующие свойства при трансфекции, эти наблюдения открывают новые пути исследования молекулярной генетики новообразований человека. |
| Категорія: Внутрішні хвороби | Додав: koljan
|
| Переглядів: 227 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
