Статистика
Онлайн всього: 9 Гостей: 9 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
ХАРАКТЕРИСТИКА ИММУННОГО ГОМЕОСТАЗА И ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ КРОВИ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМИ ВИРУСНЫМИ ГЕПАТИТАМИ
|
| 08.11.2014, 13:29 |
| Вирусные гепатиты относятся к широко распространенным заболеваниям у детей. Формирование хронического течения вирусных гепатитов наблюдается главным образом в исходе атипичных форм заболевания и определяется характером взаимоотношений между возбудителем и организмом заболевшего ребенка [4]. Причины развития хронического процесса в печени до сих пор окончательно не установлены. Согласно современным представлениям, выраженность и характер инфекционного процесса при вирусных гепатитах в значительной степени обусловлена особенностями иммунного ответа [6]. При заражении организма гепатотропными вирусами происходит дифференцировка субпопуляций Т-лимфоцитов, а их соотношение определяет развитие иммунных реакций, направленных на распознавание и подавление возбудителя [5].
Возникновение, развитие, течение и исходы хронических вирусных гепатитов (ХВГ) также в значительной мере определяются совершенством механизмов взаимосвязи специфического иммунитета с системой неспецифической резистентности, обусловленных состоянием реактивности фагоцитирующих клеток, которые в случае функциональной активации не только генерируют цитотоксические продукты, но и выделяют биологически активные вещества, влияющие на состояние других эффекторов воспаления. Воспринимая многочисленные сигналы о дестабилизации внутренней среды, фагоциты активируют свои функции, нацеленные на ее восстановление. Данный универсальный принцип лежит в основе всех фагоцитарных реакций, делая их индикатором нормы и патологии. Поэтому определение хемилюминесценции лейкоцитов может использоваться как один из критериев их способности к завершенному фагоцитозу, а, следовательно, отражения тяжести и течения заболевания [2].
Целью исследования явилось изучение показателей иммунного статуса и функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов крови у детей с хроническими вирусными гепатитами В (ХГВ) и С (ХГС).
Под нашим наблюдением находилось 56 детей в возрасте 10-15 лет больных ХВГ. Наблюдение осуществлялось в диспансерном кабинете гепатологического центра на базе инфекционного отделения МУЗ ГКБ №20 им. И.С. Берзона (г. Красноярск). Этиологическая структура наблюдаемых нами больных представлена следующим образом: ХГВ составил 67,3% (35 детей), ХГС–32,7%. Всем больным помимо общепринятых клинико-лабораторных методов обследования проводилось исследование иммунологического статуса в лаборатории научно-исследовательского института медицинских проблем Севера СО РАМН и определение функциональной активности лейкоцитов крови методом хемилюминесценции.
Выделение общей фракции лимфоцитов осуществляли по общепринятому методу в градиенте плотности фиколл-верографина с последующей очисткой от прилипающих клеток. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител CD3, CD4, CD8, CD16, HLA-DR и CD19. Для дополнительной характеристики Т-клеточного звена иммунной системы вычисляли иммунорегуляторный (CD4+/CD8+) и индекс активации Т-лимфоцитов (HLA-DR+/CD19+) [1]. Концентрацию иммуноглобулинов класса А, М, G в сыворотке крови определяли методом иммунодиффузии по Манчини. Состояние гуморального иммунитета характеризовали также уровнем относительного синтеза Ig A (Ig A/CD19+), Ig M (Ig М/CD19+) и Ig G (Ig G/CD19+). Содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови изучали методом селективной преципитации в полиэтиленгликоле.
Функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов крови определяли с помощью хемилюминесцентного анализа [7]. Исследование спонтанной и зимозан-индуцированной хемилюминесценции (ХЛ) нейтрофильных гранулоцитов крови осуществляли с помощью хемилюминесцентного анализатора “CL3606M” (СКТБ “Наука”, Красноярск, Россия) [3]. Результаты хемилюминесцентного анализа характеризовали по следующим параметрам: время выхода на максимум интенсивности (Tmax), максимальное значение интенсивности (Imax) и площадь (S) под хемилюминесцентной кривой.
Усиление ХЛ, индуцированной зимозаном, оценивали соотношением площади индуцированной (Sинд.) к площади спонтанной (Sспонт.) и определяли как индекс активации. Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартильного размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25и С75). Достоверность различий между показателями независимых выборок оценивали по непараметрическому критерию Манна-Уитни. Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 7.0 (StatSoft Inc., 2004).
При оценке клинической картины у детей с ХВГ преобладали симптомы астеновегетативного и диспепсического характера. Жалобы на боли в животе имели место у 69% пациентов. Как правило, боли носили периодический характер (76%), были ноющими (88%), локализовались в правом подреберье (72%), реже - в эпигастрии и области левого подреберья. Также отмечались ухудшение аппетита (30,7%), тошнота (3,8%), горечь во рту (15,3%). Признаки хронической интоксикации были не выражены и обнаруживались лишь у 36% детей. При осмотре отмечалась обложенность языка (53,8%), умеренное, в основном за счет правой доли, увеличение печени (34%).
В общем анализе крови у больных с ХГВ определялась тенденция к лейкопении, лимфоцитозу, замедленная СОЭ у 55%. У больных ХГС определялась только замедленная СОЭ (71%), и небольшая лимфопения (57%). У большинства больных ХГ протекал латентно (показатели аминотрансфераз не превышали нормы). В 30% регистрировалась биохимическая активность, т.е. процесс у этой группы пациентов протекал с цитолизом гепатоцитов. В ИФА у всех больных в зависимости от этиологии заболевания определялись: HBsAg, анти-HBcorIgG; анти-HCV (core-, NS3, NS4, NS5). Реакция ПЦР была положительной на ДНК к ВГВ и РНК к ВГС у всех обследуемых детей. Таким образом, несмотря на нормальные биохимические показатели, у большинства пациентов имели место признаки репликативной активности гепатотропных вирусов. Пункционная биопсия печени позволила выявить высокие показатели морфологической активности процесса (ИГА 6-8 баллов – 80%, 13-16 баллов -20%). Имеющий место фиброз у большей части больных (68,3%) расценен как умеренный (ГИС 9,02±0,18), реже (31,7%) - встречался тяжелый фиброз (ГИС14,06±0,26 баллов). Отмечена положительная корреляционная связь между давностью заболевания и стадией хронизации. При этом активность ХГ и стадия фиброза по степени своей выраженности совпадали.
При исследовании состояния иммунного статуса у детей с ХВГ выявлены значительные изменения относительно контрольных значений при отсутствии статистически достоверных различий в иммунологических показателях между группами больных ХВГ. Отмечено снижение процентного содержания лимфоцитов в периферической крови, а также абсолютного количества CD4+- и CD8+-клеток, при повышении относительного уровня CD19+- и HLA-DR+-лимфоцитов. Кроме того, только у больных ХГВ в крови статистически достоверно повышается содержание лейкоцитов и абсолютное количество CD19+-лимфоцитов и снижается процентный уровень CD4+-клеток. У детей с ХГС обнаружено увеличение относительного количества CD3+-лимфоцитов, при снижении абсолютного содержания CD16+-клеток (Р<0,05). Изменение величин показателей, характеризующих состояние гуморального иммунитета, у больных ХГВ и ХГС осуществляется однонаправлено относительно контрольных значений. Так, у больных ХВГ повышается концентрация Ig A и Ig G в сыворотке крови, а также выявлено увеличение количества ЦИК.
Таким образом, у детей с ХГВ и ХГС обнаружены практически одинаковые изменения в состоянии иммунного статуса, которое характеризуется понижением реактивности клеточного звена иммунной системы, при повышении активности гуморального. Однако у больных ХГС дополнительно выявляется снижение содержания NK-клеток, что определяет более выраженное снижение уровня противовирусной защиты организма. При исследовании функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов обнаружено, что показатели спонтанной ХЛ реакции нейтрофильных гранулоцитов у больных ХВГ не отличались от контрольных значений. Однако, при сравнении параметров индуцированной ХЛ у больных ХВГ выявлены различия в зависимости от этиологического фактора по сравнению с группой контроля. Так, у больных ХГВ отмечено достоверное снижение только Imax, а у детей с ХГС выявлено снижение Tmax, площади и индекса активации ХЛ реакции без изменения максимального значения интенсивности. Снижение продукции активных форм кислорода и азота гранулоцитами крови в ответ на экзогенный стимулятор особенно выражено у больных ХГС, по сравнению с ХГВ, что говорит о более значительном нарушении со стороны неспецифической иммунорезистентности при хронической НСV- инфекции..
Таким образом, при исследовании состояния реактивности фагоцитирующих клеток у детей с ХВГ отмечено снижение их функциональной активности. Существенное снижение продукции активных форм кислорода и азота гранулоцитами крови в ответ на экзогенный стимулятор может объясняться тем, что при данной патологии из органов кроветворения в кровяное русло поступают преимущественно лейкоциты с низкой активностью окислительных ферментов.
С помощью корреляционного анализа установлена взаимосвязь между параметрами иммунного статуса и показателями функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных ХВГ. В то же время у детей с ХГВ не обнаружено взаимосвязи между значениями спонтанной ХЛ реакции и показателями иммунного статуса. Корреляция имеет место лишь при сравнении параметров индуцированной ХЛ. Так, абсолютное содержание CD3+-лимфоцитов положительно взаимосвязано с временем выхода на максимум интенсивности (r=0,45, Р<0,05), а концентрации иммуноглобулинов M и G с S индуцированной хемилюминесцентной реакции. В то же время отмечается отрицательная корреляционная связь между значением Imax и абсолютным содержанием CD4+- (r= -0,40, Р<0,05), CD19+- (r=-0,58, Р<0,01), и HLA-DR-лимфоцитов (r= -0,54, Р<0,01). Так же обнаружена отрицательная корреляционная связь между уровнем ЦИК (r=-0,46, Р<0,05) и S индуцированной хемилюминесценции.
При оценке коэффициента корреляции у детей с ХГС отмечена взаимосвязь между показателями иммунного статуса и параметрами как спонтанной, так и индуцированной хемилюминесценции. Положительная корреляционная связь наблюдается между временем выхода на максимум спонтанной хемилюминесцентной реакции и концентрацией IgA (r=0,53, Р<0,05), Tmax индуцированной зимозаном хемилюминесценции и абсолютным содержанием CD4+-клеток (r=0,44, Р<0,05), а также между абсолютным содержанием CD8+, относительным уровнем CD3+- лимфоцитов, концентрацией IgG и площадью под индуцированной хемилюминесцентной кривой (r=0,45, Р<0,05). Относительное содержание CD3+-лимфоцитов и Imax спонтанной ХЛ положительно коррелируют между собой (r=-0,50, Р<0,05), в то время как между концентрацией IgA и Imax индуцированной реакции наблюдается отрицательная корреляционная связь(r=-0,50, Р<0,05). Также определяется положительная взаимосвязь между индексом активации и концентрацией IgM и IgG у детей с ХГВ и относительным содержанием CD3+, абсолютным содержанием CD8+-лимфоцитов и концентрацией IgG у детей с ХГС.
Таким образом, ХВГ у детей характеризуются скудностью клинических проявлений, в большинстве случаев отсутствием выраженных изменений в биохимическом анализе крови при отчетливых сдвигах со стороны параметров иммунного статуса и функциональн6ой активности нейтрофильных гранулоцитов крови. Снижение показателей индуцированной хемилюминесценцентной реакции может быть обусловлено наличием иммунодефицитного состояния, характеризующегося понижением реактивности клеточного звена иммунитета и повышением активности гуморального.
|
| Категорія: Актуальні проблеми інфекційної патології | Додав: koljan
|
| Переглядів: 651 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
