Статистика
Онлайн всього: 3 Гостей: 3 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
Позитивний відбір Т-клітин
|
| 27.09.2014, 12:25 |
| Явище позитивного відбору було відкрито на радіаційних
кістковомозкових химерах, яких отримували введенням клітин кісткового мозку F1-гібридів
генотипу МНС ахb смертельно опроміненим мишам батьківського генотипу, наприклад МНС а . У цих 54
химер Т-клітини, що розвинулися в тимусі, та всі АПК гемопоетичного походження як у тимусі, так
і на периферії мають генотип МНС ахb .
Якщо проімунізувати химер антигеном, то його пептиди будуть презентуватися АПК в асоціації як з
МНС а , так із МНС b . Однак Т-клітини
химер відповідають in vitro переважно на
антиген, презентований молекулами
МНС а . Це свідчить про те, що МНС-
рестрикцію ТкР Т-клітин визначають
стійкіші щодо опромінення клітини
тимічного оточення, в якому вони
дозрівають.
У наступних експериментах на
тимектомованих F1-гібридних мишах,
захищених тимусом батьківського
гаплотипу, було підтверджено, що за
формування МНС-рестрикції і позитивний
відбір Т-клітин відповідальна
радіорезистентна строма тимуса. Схему
експерименту наведено на мал. 89.
Гібридів MHC axb F1 після тимектомії та
імплантації тимуса МНС а або МНС b
опромінювали для елімінації власних Т-
клітин і вводили сингенний кістковий
мозок (МНС ахb ) як джерело СКК.
Проімунізувавши мишей антигеном,
вивчали in vitro проліферативну реакцію
Т-клітин лімфовузлів гібридів на антиген,
презентований АПК батьківських
гаплотипів і для контролю — гібридного
гаплотипу (мал. 89). Т-клітини гібридів з
пересадженим тимусом гаплотипу МНС а
розпізнавали антиген і проліферували
лише в комплексі з молекулами МНС а , але
не МНС b , а Т-клітини з тимусом гаплотипу
МНС b — лише в асоціації з МНС b . Т-
клітини гібридів із сингенним тимусом
були здатні розвивати реакцію на антиген,
що був презентований як на МНС а -, так і
на МНС b - клітинах. Отже, МНС-
рестрикція визначається МНС-фенотипом
не самих Т-клітин, а фенотипом тимуса, в
якому вони дозрівали. Попереднє
оброблення тимуса дезоксигуанідином, що
руйнує дендритні клітини та макрофаги,
не впливало на виникнення МНС-
рестрикції:
Виникнення МНС-рестрикції відбувається за участю
радіорезистентних стромальних клітин тимуса, якими
є, як з'ясувалося пізніше, кортикальні епітеліоцити
(див. далі).
Велике значення для вивчення процесу позитивного
відбору (та ролі власних молекул МНС у дозріванні
тимоцитів) має використання трансгенних мишей з внесеними повністю реорганізованими генами
ТкР, що кодують рецептор відомої специфічності. У таких мишей переважна більшість Т-клітин
експресують введені гени ТкР, а реорганізація власних генів ТкР інгібується. Отже, отримуючи
трансгенних мишей з наперед відомим ТкР, рестриктованим за певними молекулами МНС, можна
простежити роль саме цих молекул МНС у дозріванні тимоцитів. Показано, що у трансгенних за
ТкР мишей Т-клітини дозрівають лише тоді, коли їхні рецептори рестриктовані за МНС саме цього
гаплотипу. Т-клітини, що не можуть розпізнавати молекули власних МНС на епітелії тимуса, гинуть
на стадії подвійно-позитивних тимоцитів.
У процесі позитивного відбору визначається експресія корецепторів CD4 та CD8 на зрілих Т-
клітинах, яка чітко відповідає специфічності ТкР до власних МНС. Якщо подвійно-позитивний
тимоцит (CD4 + CD8 + ) розпізнає МНС І, то він перетворюється на монопозитивний СD8 + -тимоцит, а
якщо МНС II — то на СD4 + -тимоцит. У мишей, трансгенних за ТкР, рестриктованим за власними
молекулами МНС І, майже всі зрілі Т-клітини експресують цей рецептор і корецептор CD8, а у
мишей, трансгенних за рестриктованим за МНС II рецептором, — корецептор CD4. Залежність
експресії молекул CD4 та CD8 на зрілих Т-клітинах від МНС І- чи МНС ІІ-рестрикції ТкР чітко
простежується в імунодефіцитних людей з синдромом оголених лімфоцитів (bare lymphocyte
syndrome), для якого характерна відсутність експресії молекул МНС на лімфоцитах та епітеліоцитах
тимуса. Особи, в яких втрачена експресія молекул МНС І або МНС II, мають відповідно лише CD4
або CD8 Т-клітини. Така сама залежність спостерігається також у мишей, в яких експресія МНС І чи
МНС II блокована генним нокаутом. Отже, в процесі позитивного відбору Т-клітин у тимусі
відбувається координування експресії рецептора та корецептора у суворій відповідності до молекул
МНС. Дозвіл на виживання і подальший розвиток отримують ті тимоцити, які експресують
корецептор, здатний зв'язувати ту саму молекулу МНС, що й рецептор до антигену. Одночасно з
розгалуженням розвитку тимоцитів у напрямі СD4 + - чи СD8 + -клітин відбувається їхнє
програмування до виконання подальших функцій. CD4 Т-клітини майже всі програмуються для
секретування цитокінів, a CD8 Т-клітини — для здійснення цитотоксичної функції.
Механізми, за якими здійснюється вибір експресії корецептора і напряму диференціювання
тимоцитів у CD4 і CD8 Т-клітини, на сьогодні недостатньо вивчені. Важливу роль у цьому процесі
відіграють рецептори родини Notch 1, які експресуються на різних стадіях диференціювання (від
детермінування αβ/γδ-ТкР до позитивного відбору CD4 + CD8 + ) тимоцитів. Підвищення експресії
рецептора Notch-1 у тимоцитах комітує їхній розвиток у напрямі CD8-клітин, що може свідчити про
роль сигналу, генерованого взаємодією цієї молекули з її лігандом у тимусі, в інгібуванні
диференціювання тимоцитів на зрілі СD4Т-клітини.
Позитивний відбір тимоцитів відбувається у глибоких шарах тимічного кортексу і визначається
кортикальними епітеліальними клітинами. Докази цього були отримані в експериментах на мишах,
трансгенних за молекулами МНС І чи МНС II, які експресувалися лише на кортикальних
епітеліоцитах. Після введення мишам, в яких власні гени МНС були зруйновані, векторів з генами
відсутніх МНС та експресії цих векторів у кортикальних епітеліоцитах розвиток рестриктованих за
відповідними молекулами МНС Т-клітин відбувається нормально. При цьому нормалізація розвитку
Т-клітин спостерігається лише за умови взаємодії молекул МНС на поверхні кортикального
епітеліоцита з відповідним корецептором (МНС І — CD8, МНС II – CD4) тимоцита.
Отже, в процесі позитивного відбору здійснюється перевірка тимоцитів на правильність побудови
Т-рецептора і його здатність впізнавати антигенний пептид у комплексі з МНС. Факторами відбору
є експресовані на кортикальних епітеліоцитах власні пептиди в комплексі з власними молекулами
МНС, а об'єктом відбору — СВ4 + СВ8 + -тимоцити, що розпізнають ці комплекси.
У результаті позитивного відбору формується популяція Т-клітин, рецептори яких мають ту чи іншу
спорідненість до власних молекул МНС і здатні розпізнавати в асоціації з ними широкий спектр
пептидів (власних і чужорідних). Ці тимоцити проходять подальшу перевірку на аутореактивність у
процесі негативного відбору.
|
| Категорія: Імунологія | Додав: koljan
|
| Переглядів: 483 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
