Статистика
Онлайн всього: 6 Гостей: 6 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
Клонування ДНК виділених генів
|
| 26.09.2014, 20:28 |
| Отриману кДНК можна клонувати, тобто збільшити її кількість
у сотні разів, за допомогою відповідного вектора. Вектор — це молекула ДНК плазміди або вірусу,
в яку можна вбудувати потрібний ген для його перенесення в інші клітини, наприклад Е.соli. Цим
способом було отримано гени всіх класів і підкласів імуноґлобулінів мишей та людини, тобто
утворено бібліотеки цих генів.
У 1963 р. Арбер виявив явище рестрикції фагів, суть якого полягає в тому, що продуктивність фага
знижується в разі інфікування ним іншого штаму бактерій. Вивчення цього явища зумовило
відкриття у бактерій ферментів рестриктаз, які розрізають чужорідну ДНК на фрагменти у певних
місцях, що містять відповідну послідовність нуклеотидів. Деякі рестриктази розщеплюють
послідовність дволанцюгової ДНК з утворенням так званих «липких кінців», які здатні з'єднуватися з
аналогічними «липкими кінцями» будь-яких генів. Відкриття рестриктаз дало змогу розробити
підходи для генно-інженерних маніпуляцій з фрагментами ДНК, їх специфічного вирізання та
вбудовування у векторні молекули.
Як правило, копії кДНК певного гена вбудовують у плазміди, що містять селективні гени стійкості
до антибіотиків. Тому на середовищі з відповідним антибіотиком відбувається ріст тільки тих
бактерій, що отримали плазміду.
Плазміди виділяють з лізату клітин після вирощування культури з однієї колонії, розрізають їх
рестриктазами і вирізають ген-вставку. Таким чином можна отримати достатню кількість генів для
аналізу нуклеотидної послідовності.
|
| Категорія: Імунологія | Додав: koljan
|
| Переглядів: 504 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
