Статистика
Онлайн всього: 10 Гостей: 10 Користувачів: 0
|
 |
Матеріали для курсової |
Fab- і F(ab) 2 -фрагменти
|
| 25.09.2014, 13:12 |
| При дії на імуноґлобуліни алкілувальних і відновних речовин, а також
протеолітичних ферментів можна отримати окремі ланцюги, різні фрагменти молекул антитіл та
їхніх ланцюгів. Протеолітичний фермент папаїн розщеплює важкий поліпептидний ланцю молекули
IgG з NH 2 -кінця, а пепсин — з СООН-кінця від дисульфідних зв'язків між важкими ланцюгами (див.
мал. 36).
Папаїн розщеплює молекулу IgG на три фрагменти: два, що не кристалізуються, Fab-фраґменти І та
II (fragments antigen binding), які містять рецепторні групи до антигену, і один, що кристалізується,
— Fc-фраґмент III (fragment crystallizable). Fab-фраґменти І і II подібні між собою за властивостями
та амінокислотним складом, але значно відрізняються від Fc-фраґмента. До складу Fc-фраґмента
входить легкий ланцюг і частина важкого ланцюга, яку називають Fd-фраґментом.
Fab-фраґменти молекул очищеного γ-ґлобуліну людини одновалентні, здатні зв'язуватися з
антигеном, однак не преципітують його, не зв'язують комплемент, не проходять крізь плаценту, але
можуть фіксуватися в шкірі. Якщо розщеплювати молекулу IgG пепсином, то утворюється F (аb) 2 -
фрагмент, що складається з двох Fab-фраґментів, сполучених дисульфідним зв'язком, і залишків
важких ланцюгів, які утворилися після відщеплення F(ab) 2 -фраґмента. F(ab) 2 -фраґмент має дві
рецепторні групи, що входять до складу Fab-фраґментів. Маючи дві рецепторні групи, F(ab) 2 -
фраґмент може зв'язуватися з двома детермінантами, розміщеними на двох різних ділянках
антигену. Це може забезпечити утворення великих конгломератів, які випадають в осад. Тому
фрагмент F(ab) 2 , на відміну від Fab-фрагмента, є двовалентним і здатний преципітувати антиген, як і
нерозщеплена молекула IgG. Дослідженнями Р. Портера було показано, що антисироватки до Fab- 22
фраґментів реагували як з Н-, так і з L-ланцюгами, тоді як антисироватки до Fc-фраґменті в
реагували лише з Н-ланцюгами. Отже, Fab-фраґменти складаються як з Н-, так із L-ланцюгів, а Fc-
фраґмент — лише з Н-ланцюгів.
Константа седиментації F(ab) 2 -фраґмента становить 5S (молекулярна маса 100 000), а Fab-фраґмента
— 3,55 (молекулярна маса 50 000). Рецепторна група антитіл руйнується при розщепленні ланцюгів
поліпептидів. Під впливом відновних речовин — 0,01 М розчину цистеїну, 0,01 М розчину
меркаптоетанолу F(ab) 2 -фраґмент може розпадатися на два Fab-фраґменти, які вже не осаджують
антиген, проте можуть зв'язувати гаптен і гальмувати реакцію антигену з антитілом. Ці фрагменти
одновалентні та гомологічні з папаїновими Fab-фраґментами І і II, але їх Fd-фраґмент приблизно на
десять амінокислотних залишків довший.
Антитіла з двома рецепторними групами різної специфічності не синтезуються, однак їх можна
отримати, розщеплюючи пепсином суміші антитіл двох різних видів з наступним відновленням і
окисненням. У такому разі можливі випадкові сполучення двох різних Fab-фраґментів. F(ab) 2 -
фраґмент, що утворюється при цьому, здатний зв'язуватися з антигеном і утворювати преципітати за
наявності в суміші обох антигенів. Результати цих досліджень показали, що окремі Fab-фраґменти
антитіл моновалентні, тоді як F(ab) 2 -фраґменти й молекули IgG-антитіл двовалентні.
|
| Категорія: Імунологія | Додав: koljan
|
| Переглядів: 558 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ] |
|
|
