Статистика
Онлайн всього: 10 Гостей: 10 Користувачів: 0
|
|
Матеріали для курсової |
Тест Шиллинга с двойной меткой
| 26.04.2014, 17:24 |
Тест Шиллинга с двойной меткой был разработан W. R. Brugge и соавт. [126]. Он основывается на данных той же группы авторов [84], установивших, что витамин В,2 связывается преимущественно с R-протеином в кислом желудочном соке и не соединяется с внутренним фактором до тех пор, пока R-протеиновая половина частично не разрушится панкреатическими протеазами. Стандартный тест Шиллинга выявляет аномалии толь-
Глава 5. Диагностика панкреатитов • 263
ко у 50 % больных с экзокринной недостаточностью ПЖ [315], вероятно, потому, что многие из таких больных имеют ахлоргидрию, сопровождающуюся дефицитом R-фактора в желудочном соке. Стандартный тест Шиллинга аномален также при пернициозной анемии и тонкокишечной маль-абсорбции; следовательно, его применение в качестве метода оценки экзокринной функции ПЖ ограничено ввиду закономерно частых ложноот-рицательных и ложноположительных результатов.
В тесте Шиллинга с двойной меткой эти проблемы преодолеваются с помощью введения [5]:
а) меченного кобаламина, связанного с внутренним фактором;
б) меченного другой меткой кобаламина, связанного с R-протеином;
в) немеченого аналога кобаламина (кобинамида), который связывается
только с R-протеином;
г) свободного от их соединения внутреннего фактора для R-протеина
после его частичного разрушения панкреатическими протеазами.
Теоретически у здоровых лиц при первом и втором варианте введения (а и б) кобаламин должен всасываться в эквивалентных количествах, а отношение «R-протеин — кобаламин» — «внутренний фактор — кобаламин» равно единице, хотя практически оно стремится к более низкому значению. У больных с панкреатической мальабсорбцией плохо всасывается комплекс R-протеин — кобаламин, что связано с пониженным уровнем панкреатических протеаз в двенадцатиперстной кишке. У больных с поражением тонкой кишки одинаково плохо всасываются обе формы соединения [5].
Методика по W. R. Brugge и соавт. [126]. Используется готовая форма меченного 58Со кобаламина из набора Dicopas Schilling Test. Каждую капсулу (радиоактивность 4 мкКю/ммоль) вскрывают и содержимое растворяют в 0,15 М хлорида натрия. Раствор центрифугируют при 10 000 об/мин в течение 15 мин; супернатант, содержащий [58Со]-кобаламин, разводят с кристаллическим CN-кобаламином до получения [58Со]-кобаламина со специфической радиоактивностью 2,5 мкКю/ммоль.
Кобинамид готовят по методу J. F. Kolhouse и R. H. Allen [264] без отделения кобинамида и 13-эпикобинамида. Внутренний фактор получают в готовом виде (промышленное производство). Свиной R-протеин, как было показано W. R. Brugge и соавт. [126], вполне пригоден, хотя он более резистентен к панкреатическим ферментам, чем человеческий.
Тестовые растворы готовят, комбинируя 1 мл Н2О, содержащий 0,2 ммоль меченного 57Со кобаламина (2,5 мкКю/ммоль) с 0,6 ммоль человеческого внутреннего фактора в 4 мл 0,01 М фосфата калия (рН 7,5), содержащего 0,15 М NaCL и 50 мкг/мл бычьего сывороточного альбумина. В отдельной пробирке 5,0 мл 0,15 М NaCl, содержащего 0,2 ммоль меченного 5SCo кобаламина (4,0 мкКю/ммоль) комбинируются с 0,3 ммоль R-протеина в 5,0 мл 0,01 М фосфата калия (рН 7,5), содержащего 0,15 М NaCL и 50 мкг/мл сывороточного бычьего альбумина. Растворы R-протеина и внутреннего фактора инкубируют при комнатной температуре 30 мин и затем охлаждают до 4°С. Кобинамид в количестве 200 ммоль в 1,0 мл 0,15 М NaCL добавляют к раствору R-протеина; после инкубации в течение 20 мин при 4 "С растворы внутреннего фактора и R-протеина смешивают и хранят до использования при температуре —20 "С.
Больному натощак дают (перорально) 4 комбинированных тестовых раствора, указанных выше, после чего сразу же вводят (внутримышечно) 1 мг цианокобаламина. Мочу собирают в течение 24 ч после приема тестовых растворов и оценивают концентрацию двух изотопов кобальта.
264 • ХРОНИЧЕСКИЙ ПАНКРЕАТИТ
Если исследуемый получает панкреатические препараты, их прием следует прекратить за сутки до тестирования. Целесообразно также для минимизации диареи назначить диету с низким содержанием жира за два дня до теста, которая соблюдается и во время его проведения [5].
Результат представляют как отношение 58Со к 57Со, которое является отношением кобаламина, связанного с R-протеином, к кобаламину, связанному с внутренним фактором.
W. R. Brugge и соавт. [126] представили результаты определения отношений двух связанных кобаламинов у 26 здоровых лиц, 11 больных непанкреатическими желудочно-кишечными заболеваниями, 15 больных с симптоматической панкреатической экзокринной недостаточностью и 18 —с бессимптомной панкреатической экзокринной недостаточностью. Их данные приведены в табл. 5.13.
Данные, представленные в табл. 5.13., показывают, что тест Шиллинга с двойной меткой является высокочувствительным при диагностике ХП, клинически проявляющегося синдромом мальабсорбции. При клинически скрытой экзокринной недостаточности ПЖ тест дает неудовлетворительные результаты. Этот тест до сих пор широко не используется; для полной его оценки необходимы дальнейшие исследования. Тест прост в выполнении и не является слишком дорогостоящим. Радиационные дозы незначительны. Его можно проводить в амбулаторных условиях, что, однако, требует определенной расположенности больного ввиду необходимости сбора суточной мочи [5]. |
Категорія: Хронічний панкреатит | Додав: koljan
|
Переглядів: 515 | Завантажень: 0
|
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі. [ Реєстрація | Вхід ]
|
|
|