Від яких чинників залежить надійність результату РІА
Надійність результатів РІА залежить від аналітичних харак- теристик набору, а саме: • Чутливості. Чутливість набору РІА дуже висока. Деякі методики виявляють дуже низькі концентрації речовин, аж до 10- 14 моль/л. Наприклад, набором ПСА (простатспецифічний анти- ген) можна визначити рівень ПСА до 0,1 нг/мл. Чутливість особливо важлива при вимірюванні базальних концентрацій пептидних гормонів (ці концентрації звичайно зна- ходяться в межах від 10-13 до 10-10 моль/л), а також при визна- ченні гормонів непептидної природи, наркотиків та лікарських засобів, ферментів, бактерійних і вірусних антигенів. • Відтворюваності. - всередині аналізу. Аналіз визначення ПСА проводять з використанням 4 зраз- ків сироватки крові (табл. 13.1).Ветеринарна радіологія 354 Таблиця 13.1 Аналіз визначення ПСА всередині аналізу Зразки сироватки крові Сироватка 1 2 3 4 Кількість визначень 10 10 10 10 Середня концентрація, нг/мл 1,11 7,14 18,7 42,5 Коефіцієнт варіації, % 8,6 2,1 1,6 1,5 - між аналізами. Аналіз визначення ПСА проводять з використанням 4 зраз- ків сироватки крові (табл. 13.2). Таблиця 13.2 Аналіз визначення ПСА між аналізами Зразки сироватки крові Сироватка А В С D Кількість визначень 10 10 10 10 Середня концентрація, нг/мл 1,48 3,50 12,0 76,1 Коефіцієнт варіації, % 9,4 7,6 5,1 4,8 • Точності. При розведенні проби виміряна концентрація речовини по- винна зменшуватися пропорційно до ступеня розведення (тест на розведення). На прикладі набору для визначення ПСА 3 зразки сироватки крові розводять нульовою калібрувальною пробою і проводять аналіз згідно з інструкцією (див. таблицю 13.2). Тест на відкриття стандартної сироватки: Різні кількості ПСА додають до 4 зразків сироватки крові і проводять аналіз отриманих таким чином зразків (табл. 13.3).Таблиця 13.3 Тест на відкриття стандартної сироватки Зразок Розведення Теоретич. Виміряна “Відкриття”, концентрація, концентрація, нг/мл нг/мл % 1 нерозведен. - 11,5 - 2х 5,75 5,51 96,0 4х 2,88 2,62 91,0 8х 1,44 1,24 86,0 2 нерозведен. - 20,3 - 2х 10,2 10,2 90 4х 5,08 5,02 95 8х 2,54 2,38 100 3 нерозведен. - 82,0 2х 41,0 36,7 90 4х 20,5 19,5 95 8х 10,2 10,2 100 • Специфічності. Специфічність РІА визначається специфічністю антитіл і мо- же бути дуже високою. Отримано антитіла й розроблено методи- ки РІА, що дозволяють диференціювати антигени з мінімальними структурними відмінностями, наприклад: - Т-3 і Т-4 розрізняються лише одним атомом йоду; - Кортизол і кортикостерон розрізняються лише одним гі- дроксильним радикалом; - Інсуліни людини і свині розрізняються лише кінцевою амі- нокислотою В-ланцюга; - Інсуліни свині, кашалота і собаки мають однакову послі- довність амінокислот, розрізняються лише за рахунок різної їх конформації.
Ви переглядаєте статтю (реферат): «Від яких чинників залежить надійність результату РІА» з дисципліни «Ветеринарна радіологія»
